ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) vẫn là một kỹ thuật nền tảng trong phát hiện bệnh,cung cấp xác định và định lượng chính xác các chất mục tiêu thông qua các phản ứng miễn dịch đặc biệt kết hợp với khuếch đại enzymeTuy nhiên, các nhà nghiên cứu thường phải đối mặt với những thách thức với tín hiệu yếu, kết quả không nhất quán và các quy trình tối ưu hóa dài.
Trong phát hiện ELISA, các chỉ số hiệu suất quan trọng bao gồm giới hạn phát hiện, phạm vi động và khả năng tái tạo.sự lựa chọn của enzyme/substrate ảnh hưởng đáng kể đến các thông số nàyDo đó, việc lựa chọn chất nền phù hợp là rất cần thiết để có kết quả thử nghiệm tối ưu.
Khi phát triển các thí nghiệm ELISA, phải xem xét cẩn thận các đặc điểm của chất nền, bao gồm phạm vi động, tốc độ phản ứng và thời gian thí nghiệm.Các yếu tố này cùng ảnh hưởng đến độ tin cậy và độ chính xác của kết quả cuối cùng.
Một phạm vi động rộng đặc biệt hữu ích khi phân tích các chất phân tích trên các gradient nồng độ rộng. Khả năng này đảm bảo đo chính xác bất kể mức độ nồng độ,ngăn chặn các lỗi do bão hòa tín hiệu hoặc phát hiện không đủ.
Tốc độ phản ứng của chất nền trực tiếp ảnh hưởng đến thời gian thử nghiệm.Các công thức khác nhau đáp ứng các yêu cầu khác nhau này.
Các khung thời gian thử nghiệm tương tác chặt chẽ với phạm vi động, khả năng tái tạo và giới hạn phát hiện.
Tetramethylbenzidine (TMB) phục vụ như một chất nền nhiễm sắc thể được sử dụng rộng rãi để phát hiện peroxidase cải xoăn (HRP) trong các ứng dụng ELISA.Các công thức sẵn sàng sử dụng đơn giản hóa việc tích hợp vào các luồng công việc hiện có trong khi cung cấp các đặc điểm hiệu suất vượt trội.
Ưu điểm so sánh bao gồm nhiễu nền thấp, độ ổn định đặc biệt và độ nhạy cao.Các chất nền này cho thấy hiệu suất batch-to-batch nhất quán trong khi phù hợp với các yêu cầu thử nghiệm khác nhau thông qua tốc độ phản ứng khác nhau.
Dòng chất nền bao gồm nhiều công thức chuyên môn:
HRP xúc tác oxy hóa TMB trong sự hiện diện của hydrogen peroxide, tạo ra một sản phẩm phản ứng màu xanh.Hệ thống này cung cấp sự phát triển màu sắc nhanh chóng so với các phương pháp tiếp cận enzyme thay thế.
Đối với các hệ thống phosphatase kiềm (AP), para-nitrophenylphosphate (pNPP) phục vụ như là chất nền ưa thích, tạo ra màu vàng có thể đo ở 405nm.Các công thức sẵn dùng có chứa chất ổn định đảm bảo sự ổn định lâu dài.
Các chất nền nhiễm sắc thể thay thế tạo ra các sản phẩm màu xanh lá cây hòa tan khi phản ứng với HRP, cung cấp các tùy chọn bổ sung cho các yêu cầu thử nghiệm cụ thể.
Sản xuất diễn ra trong các cơ sở được chứng nhận ISO 13485:2016 và 9001:2015, đảm bảo chất lượng liên tục giữa các lô và độ tin cậy hiệu suất.Khung chất lượng này hỗ trợ các kết quả thử nghiệm có thể tái tạo trên các ứng dụng nghiên cứu và chẩn đoán.
