Việc duy trì mức pH ổn định là một yêu cầu cơ bản trong nghiên cứu sinh học, đặc biệt là trong nuôi cấy tế bào và các nghiên cứu về enzyme. Sự dao động về pH có thể ảnh hưởng đáng kể đến khả năng sống của tế bào, hoạt động của enzyme và khả năng tái tạo của thí nghiệm. Các hệ thống đệm bicarbonate truyền thống, mặc dù thường được sử dụng, nhưng lại nhạy cảm với sự thay đổi nồng độ carbon dioxide, khiến chúng kém tin cậy hơn trong việc duy trì mức pH ổn định.
HEPES (axit 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic) là một chất đệm sinh học zwitterionic đã trở nên không thể thiếu trong các phòng thí nghiệm hiện đại. Các đặc tính hóa học độc đáo của nó cho phép nó duy trì pH sinh lý ngay cả khi nồng độ carbon dioxide thay đổi, cung cấp một môi trường ổn định cho sự phát triển của tế bào và các phản ứng sinh hóa.
Không giống như các chất đệm truyền thống, HEPES thể hiện độ ổn định pH đặc biệt trên nhiều điều kiện thí nghiệm. Phạm vi đệm hiệu quả của nó từ pH 6.8-8.2 làm cho nó đặc biệt phù hợp với các hệ thống sinh học yêu cầu các điều kiện gần sinh lý.
Trong các ứng dụng nuôi cấy tế bào, đệm HEPES mang lại một số lợi thế riêng biệt:
Nồng độ làm việc điển hình cho các ứng dụng nuôi cấy tế bào nằm trong khoảng từ 10-25 mM, cung cấp khả năng đệm đầy đủ mà không gây ra căng thẳng thẩm thấu.
HEPES thể hiện các đặc tính độc đáo trong các ứng dụng nhiệt độ thấp. Khi nhiệt độ giảm, các đặc tính phân ly của nó thay đổi, dẫn đến tăng cường khả năng đệm trong điều kiện lạnh. Điều này làm cho nó đặc biệt có giá trị cho:
Là một phần của hệ thống đệm Tris-HEPES, nó cung cấp các điều kiện pH ổn định cho điện di gel polyacrylamide (PAGE), đảm bảo sự phân tách và độ phân giải protein thích hợp.
Duy trì pH tối ưu cho các phản ứng enzyme, đặc biệt là những phản ứng yêu cầu kiểm soát pH chính xác hoặc được tiến hành ở nhiệt độ không chuẩn.
Giúp duy trì sự ổn định của protein trong quá trình tinh chế, giảm sự kết tụ và biến tính.
Khi chọn đệm HEPES cho các ứng dụng nghiên cứu, một số thông số chất lượng nên được xem xét:
Các đặc tính vật lý của HEPES chất lượng cao bao gồm dạng bột tinh thể màu trắng, độ hòa tan trong nước tuyệt vời và thời hạn sử dụng ổn định khi được bảo quản đúng cách.
Để có kết quả tối ưu với đệm HEPES:
Tính linh hoạt và độ tin cậy của đệm HEPES đã biến nó thành một công cụ thiết yếu trong nghiên cứu sinh học hiện đại. Khả năng duy trì các điều kiện pH ổn định trên nhiều thiết lập thí nghiệm khác nhau của nó đóng góp đáng kể vào khả năng tái tạo thí nghiệm và chất lượng dữ liệu trong các nghiên cứu khoa học đời sống.
Việc duy trì mức pH ổn định là một yêu cầu cơ bản trong nghiên cứu sinh học, đặc biệt là trong nuôi cấy tế bào và các nghiên cứu về enzyme. Sự dao động về pH có thể ảnh hưởng đáng kể đến khả năng sống của tế bào, hoạt động của enzyme và khả năng tái tạo của thí nghiệm. Các hệ thống đệm bicarbonate truyền thống, mặc dù thường được sử dụng, nhưng lại nhạy cảm với sự thay đổi nồng độ carbon dioxide, khiến chúng kém tin cậy hơn trong việc duy trì mức pH ổn định.
HEPES (axit 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic) là một chất đệm sinh học zwitterionic đã trở nên không thể thiếu trong các phòng thí nghiệm hiện đại. Các đặc tính hóa học độc đáo của nó cho phép nó duy trì pH sinh lý ngay cả khi nồng độ carbon dioxide thay đổi, cung cấp một môi trường ổn định cho sự phát triển của tế bào và các phản ứng sinh hóa.
Không giống như các chất đệm truyền thống, HEPES thể hiện độ ổn định pH đặc biệt trên nhiều điều kiện thí nghiệm. Phạm vi đệm hiệu quả của nó từ pH 6.8-8.2 làm cho nó đặc biệt phù hợp với các hệ thống sinh học yêu cầu các điều kiện gần sinh lý.
Trong các ứng dụng nuôi cấy tế bào, đệm HEPES mang lại một số lợi thế riêng biệt:
Nồng độ làm việc điển hình cho các ứng dụng nuôi cấy tế bào nằm trong khoảng từ 10-25 mM, cung cấp khả năng đệm đầy đủ mà không gây ra căng thẳng thẩm thấu.
HEPES thể hiện các đặc tính độc đáo trong các ứng dụng nhiệt độ thấp. Khi nhiệt độ giảm, các đặc tính phân ly của nó thay đổi, dẫn đến tăng cường khả năng đệm trong điều kiện lạnh. Điều này làm cho nó đặc biệt có giá trị cho:
Là một phần của hệ thống đệm Tris-HEPES, nó cung cấp các điều kiện pH ổn định cho điện di gel polyacrylamide (PAGE), đảm bảo sự phân tách và độ phân giải protein thích hợp.
Duy trì pH tối ưu cho các phản ứng enzyme, đặc biệt là những phản ứng yêu cầu kiểm soát pH chính xác hoặc được tiến hành ở nhiệt độ không chuẩn.
Giúp duy trì sự ổn định của protein trong quá trình tinh chế, giảm sự kết tụ và biến tính.
Khi chọn đệm HEPES cho các ứng dụng nghiên cứu, một số thông số chất lượng nên được xem xét:
Các đặc tính vật lý của HEPES chất lượng cao bao gồm dạng bột tinh thể màu trắng, độ hòa tan trong nước tuyệt vời và thời hạn sử dụng ổn định khi được bảo quản đúng cách.
Để có kết quả tối ưu với đệm HEPES:
Tính linh hoạt và độ tin cậy của đệm HEPES đã biến nó thành một công cụ thiết yếu trong nghiên cứu sinh học hiện đại. Khả năng duy trì các điều kiện pH ổn định trên nhiều thiết lập thí nghiệm khác nhau của nó đóng góp đáng kể vào khả năng tái tạo thí nghiệm và chất lượng dữ liệu trong các nghiên cứu khoa học đời sống.
